Procedura działania sterylizacji tlenku etylenu

(1) Zgodnie z wymaganiami testowymi przygotuj zawieszenie zarodników i plastry bakteryjne Bacillus subtilis var. subtilis var. Niger. Plasterki bakteryjne są uszczelnione w dwuwarstwowych plastikowych torbach polietylenowych, do każdego testu używane są 2 plastry na torbę . 20.
(2) Ustaw jeden punkt w wewnętrznych, środkowych i zewnętrznych warstwach sterylizatora, na łącznie 9 punktów. Umieść jedną torbę na środku każdego punktu, w sumie 18 worków testowych plasterków bakteryjnych. Umieść kolejną torbę (2 plastry) plasterków bakteryjnych w temperaturze pokojowej jako kontrolę pozytywną.
(3) Wykonaj sterylizację tlenku etylenu w warunkach pełnego obciążenia zgodnie ze stężeniem tlenku etylenu, czasem działania, temperaturą i wilgotnością względną w szafce określonej w instrukcji obsługi. Pełne obciążenie zależy od celu sterylizatora. Po zabiegu wyjmij plastry bakteryjne, przenieś je do 5 ml pożywki bulionu odżywczego i hodowlę je w inkubatorze 37 stopni. Obserwuj końcowe wyniki po 7 dniach (jakościowy test kultury).
W przypadku rur bulionu składników odżywczych z trudnymi do sadzenia wyniki, weź 0,2 ml zawiesiny i zaszczepiaj płytkę agarową. Użyj sterylnego kijka L, aby równomiernie rozprzestrzeniać się i umieścić w inkubatorze 37 stopni do hodowli. Po 48 godzinach zabarwiaj rozmaz i obserwuj morfologię kolonii pod mikroskopem lub wykonaj inne testy w celu ustalenia, czy istnieje wzrost, czy też wzrost jest bakterią testową. Jeśli nie są to bakterie testowe, test należy powtórzyć.
(4) Podczas testu należy jednocześnie ustawić jakościowe i ilościowe grupy kontroli pozytywnej oraz grupy kontroli negatywnej.
(5) W przypadku ilościowej grupy kontroli pozytywnej umieść tę samą partię testowych plasterków bakteryjnych w temperaturze pokojowej. Po tym, jak grupa testowa dezynfekcji lub sterylizacji osiągnie określony czas działania, natychmiast umieść dwa kawałki plasterków bakteryjnych w rurkach testowych zawierających 5,0 ml PBS i wstrząśnij każdą 80 razy. Weź roztwór prania i policz hodowlę żywych bakterii zgodnie z metodą pokazaną w 2.1.1.3.
(6) W przypadku jakościowej grupy kontroli pozytywnej umieść testowe plastry bakteryjne z tej samej partii w temperaturze pokojowej. Po tym, jak grupa testowa sterylizacji osiągnie określony czas działania, natychmiast zaszczep 2 plasterków bakteryjnych do 5,0 ml pożywki bulionowej składników odżywczych, umieść je w inkubatorze do hodowli jakościowej i obserwuj, czy istnieje wzrost bakteryjny.
(7) W przypadku grupy kontroli negatywnej zaszczepiaj 2 bezblamieniowe plastry próbki z tej samej partii do 5,0 ml pożywki bulionowej odżywczej i umieść niezamieszknięte pożywkę bulionu składników odżywczych w inkubatorze do hodowli jakościowej, aby zaobserwować, czy istnieje wzrost bakteryjny.
(8) Test powtarza się 5 razy.
(9) W każdym z 5 testów odzyskana liczba bakteryjna plasterki bakteryjnej kontroli pozytywnej powinna wynosić od 5 × 10 cfu/plasterek i 5 × 10 cfu/plasterek; Jakościowa grupa kontroli pozytywnej powinna mieć dobry wzrost bakterii; a kontrola negatywna nie powinna mieć wzrostu bakterii. Jeśli wyniki kontroli dodatniej lub negatywnej nie spełnią powyższych wymagań, test będzie nieprawidłowy i powtarzany.
Przepisy oceny
W pięciu testach sterylizacji ilościowa grupa kontroli pozytywnej w każdym teście miała wykryta i odzyskana liczba bakteryjna wynosząca 5 × 10 CFU/kawałek do 5 × 10 cfu/kawałek; Jakościowa grupa kontroli pozytywnej miała dobry wzrost bakterii. Kontrola negatywna nie powinna mieć wzrostu bakterii. Gdy wszystkie testowe elementy bakteryjne nie mają wzrostu bakterii, sterylizacja jest uważana za kwalifikowaną.
Środki ostrożności
(1) Temperatura i wilgotność względna mają duży wpływ na działanie sterylizacji gazu tlenku etylenu, więc odpowiednie warunki w teście powinny być ściśle kontrolowane.
(2) Ciecz tlenku etylenu może rozpuszczać polietylen, chlorek poliwinylu itp., A jej cieczy nie należy kapać na takich przedmiotach. Tlenek etylenu, zarówno cieczy, jak i gazu, może uszkodzić produkty celuloidowe, dlatego należy zachować ostrożność podczas testu.
(3) Tlenek etylenu jest łatwopalny i wybuchowy. W miejscu operacji należy podjąć środki zapobiegania pożarom i eksplozji, a otwarte płomienie i iskry elektryczne nie powinny być dozwolone.
(4) Wdychanie nadmiernego gazu tlenku etylenu może powodować objawy zatrucia, takie jak ból głowy i wymioty, aw ciężkich przypadkach może powodować obrzęk płuc. Środowisko pracy powinno mieć dobrą wentylację. W 8-godzinnym dniu pracy stężenie tlenku etylenu nie powinno przekraczać 1,82 mg/m3 (1 ppm), a stężenie ekspozycji podczas 15-minutowej pracy nie powinno przekraczać 9,1 mg/m3 (5,0 ppm). Jeśli wystąpią objawy zatrucia, natychmiast opuść scenę. W łagodnych przypadkach oddychaj świeże powietrze, aż objawy znikną; W ciężkich przypadkach wyślij do szpitala na leczenie na czas.